近日,中國科學(xué)院水生生物研究所向我司提供一臺超聲波發(fā)生器,可以用于湖泊水體富營養(yǎng)化的改善,我司實驗室為驗證超聲波是否對藻類有去除效果,進(jìn)行驗證。由于超聲波發(fā)生器過大,不適用于實驗室實驗,改用超聲波清洗機(jī),進(jìn)行初步的實驗。
實驗主要是依據(jù)特定頻率的超聲波所產(chǎn)生的震蕩波,作用于水藻的外壁并使之破裂、死亡,以達(dá)到消滅水藻平衡水環(huán)境生態(tài)的目的。
一、實驗用品:加勒比單針藻、180w、40kHz超聲波清洗機(jī)、燒杯、鳳凰光學(xué)顯微鏡、血球計數(shù)版、蓋玻片。
二、實驗步驟:首先用500ml燒杯取加勒比單針藻液,置于超聲儀中分別超聲40s、1min、3min、5min、7min、9min,超聲結(jié)束的藻液倒入聚乙烯瓶保存,采用血球計數(shù)法對原藻液和不同超聲時間的藻液進(jìn)行計數(shù),計數(shù)步驟如下:
?、偃崈舻难蛴嫈?shù)板一塊,在計數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片;
?、谟?0μl移液器吸取魯哥氏固定液固定過的藻液(如果濃度過高,進(jìn)行稀釋),從計數(shù)板中間平臺兩側(cè)的溝槽內(nèi)沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴;
?、垤o置片刻,使細(xì)胞沉降到計數(shù)板上,不再隨液體漂移。將血球計數(shù)板放置于顯微鏡的載物臺上夾穩(wěn),先在低倍鏡下找到計數(shù)區(qū)后,再轉(zhuǎn)換高倍鏡下。
?、茉谙聢D中的區(qū)域(25個中格選5個區(qū)域)進(jìn)行計數(shù)。
?、輰嶒炛忻總€樣品觀測3次,取平均值。
根據(jù)如下公式進(jìn)行計算:細(xì)胞數(shù)(ml)稀釋倍數(shù)。
三、部分實驗圖片:
四、部分實驗數(shù)據(jù):
根據(jù)40s—9min超聲藻液細(xì)胞數(shù)的計數(shù),計算出去除率,制作曲線,去圖所示:
由圖可知,180w、40kHz超聲波清洗機(jī)在40s前對藻樣沒有明顯影響,40s后去除率呈穩(wěn)定上升趨勢,得知,超聲波對單針藻有一定的破碎和去除效果。
湖泊、水庫是我國重要的淡水資源,近20年來經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展和不適當(dāng)?shù)乃Y源開發(fā)利用,使淡水資源受到不同程度的污染從而導(dǎo)致水體富營養(yǎng)化。而水藻細(xì)胞壁會在特殊頻率的超聲振蕩下破裂,藻細(xì)胞隨之死亡,以達(dá)到平衡水體生態(tài)環(huán)境的目的。使藻體的細(xì)胞壁、氣胞和活性酶得到破壞是超聲波抑藻殺藻的主要機(jī)理。在一定頻率時成為空化泡而破裂,使細(xì)胞的生理生化活性受到影響。從而緩解因水體富營養(yǎng)化帶來的水資源問題。
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